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C 사설 카지노 프로토콜

다음 프로토콜은 대부분의 식물 종에 대해 일관된 결과를 제공하는 실험실에서 일상적으로 사용되는 표준 C 사설 카지노 프로토콜을 설명합니다.

    1. 3-4 일 동안 축축한 여과지에 페트리 접시의 씨앗을 발아하십시오.
    2. 1.5–2.5cm 길이의 루트 팁을 수집하고 실온에서 3 시간 동안 0.05% 콜히친으로 전처리하십시오. 콜히친 전처리는 얼음물 전처리와 비교하여 유사 분열 지수가 낮아 지지만 더 나은 염색체 형태 및 사설 카지노 대비를 제공합니다.
    3. 수정Carnoy 's I4 ° C사설 카지노 재료가 더 오랜 시간 (2 주 ~ 몇 개월) 동안 고정 용액에 저장 될 때 최소 1 시간 동안 완전한 중기 스프레드가 더 쉽게 얻을 수 있습니다. 감수 분열 염색체의 경우 Carnoy 's I의 전처리없이 적절한 분열 단계에있는 Anthers를 고정하십시오.
    4. 45% 아세트산으로 스쿼시 준비를합니다. 스쿼시하기 전에 45% 아세트산으로 2-3 분 전처리는 조직을 부드럽게하고 스쿼시를 더 쉽게 만듭니다.
    5. 얼어 붙을 때까지 드라이 아이스에 넣어 덮개 슬립을 제거하십시오.
    6. 즉시 99% 에탄올에 슬라이드를 배치하십시오. 슬라이드는 밤새 에탄올에 보관해야하며 다음날 염색 절차가 계속되었습니다.
    7. 공기는 몇 분 동안 슬라이드를 건조시킵니다.
    8. 60 ℃사설 카지노 수조사설 카지노 0.2 N HCl사설 카지노 1 분 동안 슬라이드를 인큐베이션한다. 치료의 시간과 온도는 좋은 대비에 중요합니다.
    9. 증류수로 간단히 씻으십시오.
    10. 포화 BA (OH)사설 카지노 7 분 동안 슬라이드를 인큐베이션합니다.2실온사설 카지노. 포화 BA 준비 (OH)2증류수사설 카지노 용액을 사용하여 실온사설 카지노 30 분 동안 저어주고 사용하기 전에 여과합니다. 이 솔루션은 매번 신선하게 준비해야합니다.
    11. 증류수로 간단히 씻으십시오.
    12. 60 ° C사설 카지노 수조사설 카지노 2 x SSC사설 카지노 30 분 동안 슬라이드를 인큐베이션합니다.
20 X SSC 스톡 솔루션
Tri-Sodium-Citrate-2-Hydrate
NA3C6H5O7· 2H2O
88.2 g
염화나트륨
NACL
175.3 g
증류수
DH2O
to 1 l
    1. 2 X SSC사설 카지노 스테인 링 솔루션으로 직접 미끄러짐을 움직입니다. 이는 Giemsa 염색의 10% 솔루션 (BDH, Giemsa의 얼룩 개선 된 R66 솔루션 'Gurr', Stock #35086 4x (Gallard-Schlesinger Industries, Inc; Ny 800-645-0345-0345-0345-). 7.
Soerensen 's Buffer
Stock stain
파트 A 인산 나트륨이 바바스 (NA2HOP4) 9.47 G / L H2O 58 ml
파트 B 칼륨 디 하이드로 겐 포스페이트 (KH2PO4) 9.07 G / L H2O
42 ml
  1. 증류수에 슬라이드를 헹구고 공기 건조하십시오.
  2. 영구 슬라이드의 경우 자일린에 담그고 퍼 뜨립니다. 대부분의 슬라이드는 대비 상실없이 몇 년 동안 저장 될 수 있습니다.
  3. Microphotograph는 Kodak Imagelink HQ Microfilm 1461 또는 Kodak Technical Pan Film 2415와 같은 고해상도 필름으로 취해야합니다.