플루오로 크롬이있는 현장 혼성화 (ISH) 카지노 룰렛 사이트 검출

1. 2 x SSC 솔루션에 슬라카지노 룰렛 사이트를 담그고 덮개 슬립이 슬라카지노 룰렛 사이트에서 떨어지게하여 덮개 슬립을 제거합니다.
2. 다음 단계를 사용하여 슬라카지노 룰렛 사이트를 세척합니다 (배경 감소를 위해 SSC 처리의 온도와 시간이 증가 할 수 있음)

5 분 동안 실온에서 2 x SSC,

37 ° C에서 10 분 동안 2 x SSC,

2 x SSC는 5 분 동안 실온에서,

1 x PBS 5 분 동안 실온에서

1. 종이 타월에 슬라카지노 룰렛 사이트를 배수 (마르지 않음). 100 μl IgG 분획 토끼 항 비오틴 (Enzo Diagnostics #43861, 1 : 100 희석)을 추가하고 '22 x 40 'mm 커버 슬립으로 덮으십시오.
2. 슬라카지노 룰렛 사이트를 기울이거나 1 x PBS로 비이커에 슬라카지노 룰렛 사이트를 담그면 덮개 슬립을 제거합니다. 1 x PBS (각 5 분)에서 실온에서 3 회 미끄러 져 가십시오.
3. 슬라카지노 룰렛 사이트를 1 x PBS를 포함하는 비이커에 기울이거나 담그면 덮개 슬립을 제거합니다.
4. 5 분 동안 실온에서 1 x PBS로 슬라카지노 룰렛 사이트를 세척하십시오.
5. 종이 타월에 배수 슬라카지노 룰렛 사이트, 1-µg/ml 프로피 디움 요오드 라카지노 룰렛 사이트를 함유 한 얇은 방해 용액 (글리세롤에 10-mg/ml p- 페닐 로덴 디아민)의 얇은 층을 첨가하고 덮개 슬립으로 덮습니다.
6. FITC 및 Propidium 요오다 이드는 450-490 nm에서 여기되어야합니다. 하이브리드 화 카지노 룰렛 사이트는 색상이 황록색 인 반면, 염색체는 빨간색으로 불소입니다.